El diluyente más utilizado para este recuento es el líquido de Hayem, que contiene mercurio con la finalidad de destruir los leucocitos.
La técnica se basa en diluir la sangre con líquido de HAYEM en porciones exactas. El lìquido de Hayem es una solucion compuesta por sales, las cuales hacen que la solución obtenga el grado de isotónica permitiendo que los eritrocitos se mantengan completos, mientras que los leucocitos se lisan por acciòn de la concentración de la solución al penetrar al núcleo.
MATERIAL
Tubos de ensaye 13×100
Pipeta de Thoma para glóbulos rojos
Camara de Neubauer
Boquillas
Microscopio
Gasa
Gradilla
Contador de celulas
Material biológico :sangre capilar o venosa anticoagulada
REACTIVOS
EDTA (al 10%)
Liquido de Hayem
PROCEDIMIENTO
1.-Llenar con sangre la pipeta de Thoma para glóbulos rojos hasta la marca de 0.5
2.-Limpiar cuidadosamente con gasa exterior de la pipeta
3.-Aforar la pipeta con liquido de Hayem hasta la marca de 101
4.-Agitar durante 3 min. La pipeta hasta lograr la homogenización
5.-Colocar el cubrehematìmetro sobre la càmara.
6.-Eliminar de 4 a 5 gotas de la pipeta y llenar la càmara por uno de los bordes del cubrehematìmetro
7.-Se deja reposar de 3 a 5 min sobre la platina del microscopio
9.-Con el objetivo 40X se cuentan los eritrocitos contenidos en 80 cuadros pequeños uno central y cuatro de los extremos.
CALCULOS
No de eritrocitos/mm3 = N X 200 X 10 X 400 = N X 10 000
80
N= numero de eritrocitos contados
200= factor de dilución
10= corrección por la altura de la cámara